您需要win32security模块，它是pywin32的一部分。这是做您想做的事情的示例。
该示例为该文件创建了一个新的DACL并替换了旧的DACL，但是修改现有的DACL很容易。您需要做的就是从安全描述符中获取现有的DACL，而不是创建一个空的DACL，如下所示：
import win32security
import ntsecuritycon as con
FILENAME = "whatever"
userx, domain, type = win32security.LookupAccountName ("", "User X")
usery, domain, type = win32security.LookupAccountName ("", "User Y")
sd = win32security.GetFileSecurity(FILENAME, win32security.DACL_Security_INFORMATION)
dacl = sd.GetSecurityDescriptorDacl() # instead of dacl = win32security.ACL()
dacl.AddAccessAllowedAce(win32security.ACL_REVISION, con.FILE_GENERIC_READ | con.FILE_GENERIC_WRITE, userx)
dacl.AddAccessAllowedAce(win32security.ACL_REVISION, con.FILE_ALL_ACCESS, usery)
sd.SetSecurityDescriptorDacl(1, dacl, 0) # may not be necessary
win32security.SetFileSecurity(FILENAME, win32security.DACL_Security_INFORMATION, sd)
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